A.I. Polinova, D.R. Zagirova, L.Yu. Kokaeva, I.I. Busko, I.V. Levantseviĉ, S.N. Elansky
En la lastaj jaroj la fitosanita stato de terpomaj kaj semaj akcioj rimarkeble malboniĝis en Belorusujo. La rolo de iuj specoj de malutilaj organismoj kaj ilia rilatumo en agrofitocenozoj ŝanĝiĝis. La malutileco de multaj ne nur disvastigitaj malsanoj (malfrua rusto, alternario, ĉiuj specoj de krusto, bakterio, seka fusarium-putro) pliiĝis, sed ankaŭ novaj, nesufiĉe studitaj, kiel vundita akva putro (Fig. 1). Ĉi tiu malsano, kiu okazas en Barato, Centra Azio kaj aliaj sudaj landoj, estis rimarkita en la regionoj Gomel, Brest, Grodno kaj Minsk de Belorusujo. Kiel aliaj grund-loĝantaj omicetoj, P. ultimum kaŭzas amasan damaĝon en kondiĉoj de troa malsekeco - en malbone drenitaj lokoj, dum longedaŭraj pluvoj (Taylor et al., 2008).
En Belorusujo la disvastiĝo de la malsano estis rimarkita en jaroj kun pliigita temperaturo de la kresksezono: en iuj aroj de terpomoj, 8-10% de tuberoj estis tuŝitaj. Vundita akva putro de tuberoj povas kaŭzi gravan damaĝon, kiun kaŭzas la manko de rezistemaj varioj, evoluintaj protektaj rimedoj kaj la rapida disvolviĝo de la malsano en kazo de damaĝo al tuberoj (Zhuromskaya, 2003; Ivanyuk et al., 2005). La malsano influas nur tuberojn. En Rusujo vundita akva putro ankoraŭ ne estas signifa.
En ĉi tiu verko, ni esploris 4 trostreĉojn de kaŭzaj agentoj de vundita akva putro izolita de la tuŝitaj terpomaj tuberoj de variaĵoj Vektar Belorusa, Skarb kaj selektaj hibridoj en la provizejoj de la Scienca kaj Praktika Centro de la Nacia Akademio de Sciencoj de Belorusujo por Terpomo kaj Hortikulturo (Minska regiono) La celoj de la studo estis determini la speciojn apartenantajn de la izolitaj izolitaĵoj, ilian severecon rilate al terpomaj tuberoj, taksi la kreskon ĉe malsamaj ĉirkaŭaj temperaturoj kaj reziston al metalaxil.
La micelo de la izolitaĵoj kreskis sur likva pizmedio (180 g da frostaj verdaj pizoj estas boligitaj dum 10 minutoj en 1 litro da distilita akvo, poste ili estas aŭtoklavitaj 30 minutojn je 1 atm); DNA estis izolita de ĉiu trostreĉiĝo. Por izoli DNA, frosta micelo estis triturita en likva nitrogeno, lizita en CTAB-bufro, kaj poste deproteinigita per kloroformo. La DNA estis stokita en dejonigita akvo je –20 ° С. Analizo de nukleotidaj sekvencoj de specioj-specifaj genomaj regionoj (regionoj de nukleaj ribosomaj genoj 18S kaj 5,8S, kaj ankaŭ la interna transskribita intergena interaĵo ITS1) plifortigita per enkondukoj ITS1 kaj ITS2 (Blanka, 1990), montris, ke la studitaj trostreĉoj apartenas al la specioj de Pythium ultimum Trow. (sinonimo Globisporangium ultimum (Trow) Uzuhashi, Tojo & Kakish).
Ĉiuj studitaj trostreĉoj influis tranĉaĵojn Gala-terpomaj tuberoj metitaj en humidajn ĉambrojn. Mallumaj makuloj formiĝis sur ili, poste transformiĝante en humidajn profunde penetrantajn ulcerojn (Fig. 2). Infekto estis efektivigita metante la P. ultimum micelon en la centron de la tubera tranĉaĵo.
La inokulitaj tuberaj diskoj estis kovataj je + 22 ° C. La maksimuma kreskorapideco de la trafita areo estis rimarkita en la unuaj 2 tagoj, tiam la areo de la ulcero restis preskaŭ senŝanĝa.
Ĉi tiu ŝablono validis por ĉiuj studitaj trostreĉoj.
La kreskorapideco de la trostreĉoj estis taksita sur avena agarmedio ĉe temperaturoj de 5, 15, 24 kaj 34 ° C (Fig. 3). Oni konstatis kreskon ĉe ĉiuj temperaturoj; la maksimuma kreskorapideco estis observita je 24 ° C (la 86 mm-taso estis tute superkreskita en 2 tagoj). Je 15 kaj 34 ° C, la kreskorapideco estis signife pli malalta (la taso kreskis respektive en 4 kaj 3 tagoj, respektive).
Je temperaturoj de 15, 24 kaj 34 ° C, la kreskorapidecoj de ĉiuj studitaj trostreĉoj ne diferencis. Je temperaturo de 5 ° C, trostreĉiĝo P1 kreskis multe pli rapide ol aliaj (20 mm en la 4a tago), P4 - iom pli malrapida (10 mm en la 4a tago), P2 kaj P3 preskaŭ ne kreskis.
Notindas ankaŭ, ke kun temperaturo de 24 ° C kresko komenciĝis tuj post plantado sur plado, ĉe temperaturoj de 15 kaj 34 ° C estis malfruo en la komenco de aktiva kresko de 1 tago, kaj je 5 ° C - de 2 tagoj.
Metalaxyl (kaj ĝia izomera mefenoksam) estas agnoskita kiel la plej efikaj drogoj por kontrolo de grundaj omicetoj. Metalaxil kapablas penetri tuberojn kaj provizi (eĉ kun tre malaltaj koncentriĝoj) sian longtempan protekton (Taylor et al., 2008; Bruin et al., 1982). Tamen la efikeco de metalaxyl malpliiĝas akre post la apero de rezistemaj trostreĉoj en populacioj. Tre rezistemaj trostreĉoj estis trovitaj en pluraj regionoj de Usono (Taylor et al., 2002). Estas neniuj datumoj pri la rezisto de belorusaj P. ultimum-trostreĉoj al metalaxil, kaj tial oni decidis testi ilian reziston al la drogo en ĉi tiu verko.
La studo de susceptibilidad al la fungicida metalaxyl estis efektivigita sur avena agar-medio kun aldono de fungicido ĉe malsamaj koncentriĝoj (Pobedinskaya, Elansky, 2014).
La studitaj trostreĉoj havis iujn diferencojn en rezisto al metalaxyl (Tabelo 1). Tiel, ĉe fungicida koncentriĝo de 1 mg / l, la kresko de la cepo P4 tute ĉesis, kaj la resto de la cepoj tre malrapidiĝis. Trostreĉoj P1 kaj P2 kreskis tre malrapide sur komunikilo kun metalaksil-koncentriĝo de 10 mg / L. La kalkulita efika koncentriĝo EC50 (la koncentriĝo de la fungicido bremsanta la kreskorapidecon de la trostreĉiĝo de 2 fojojn relative al la kontrolo) por ĉiuj trostreĉoj estis malpli ol 1 mg / L. Tiel, ĉiuj esploritaj trostreĉoj estis sentemaj al metalaxil; ĝi montriĝis tre efika por malhelpi la kreskon de P. ultimum.
Laŭ Bruin et al. (1982) post kuracado de plantoj dum vegetaĵaro kun metalaxilo en dozo de 0,5 kg / ha, la amasiĝo de fungicido en tuberoj estis 0,055 μg / g en la peridermo, 0,022 μg / g en la kortikala tavolo, kaj 0,034 μg / g en la centra parto de la tubero. Laŭ niaj datumoj, ĉi tiu koncentriĝo de metalaxil estas nesufiĉa por kontraŭagi la malsanon, sed povas malrapidigi ĝian disvolviĝon.
Kreskante sur avena medio, ĉiuj trostreĉoj formis oosporojn en monokulturo (Fig. 4), kio estas tipa por P. ultimum. Parsume splisado de la trostreĉoj montris neniujn videblajn simptomojn de vegetativa neagordigebleco - la tasoj estis egale kovritaj per micelo.
La akiritaj datumoj indikas, ke P. ultimum estas fitopatogeno kapabla rapidan kreskon en vasta temperaturo, inkluzive ĉe stoka temperaturo de 5 ° C. Ĝi estas virulenta al la ŝtofoj de terpomaj tuberoj kaj formas oosporojn kapablajn longtempe postvivi. Tiel, la specio estas danĝera fitopatogeno, kiu povas minaci agrikulturon kaj bezonas plian studon.
La esplorado estis realigita kun la subteno de la Rusia Scienca Fondaĵo (projekto N 14-50-00029).
Tabelo 1. Sentemo de P. ultimum-trostreĉoj al metalaxyl
Trostreĉiĝo | Koncentriĝo de metalaxil, mg / l | ||
0 (kontrolo) | 1 | 10 | |
P1 | 63 | 6 | 0 |
P2 | 65 | 5 | 0 |
P3 | 59 | 0 | 0 |
P4 | 61 | 0 | 0 |
P1 | 105 | 10 | 3 |
P2 | 110 | 10 | 3 |
P3 | 95 | 0 | 0 |
P4 | 98 | 0 | 0 |
Ĉirkaŭ. La averaĝaj datumoj por 3 mezuroj estas donitaj.
La artikolo estis publikigita en la ĵurnalo "Terpoma Protekto" (n-ro 1, 2017)